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SmartFlare活细胞RNA检测技术

                            来源:Market    2013-9-2

SmartFlare RNA“灵光”

——活细胞RNA检测技术

 

突破性的纳米创新技术,开辟RNA研究新时代!

 

  • 无需样本制备
  • 无需 RNA 扩增
  • 无需转染试剂
  • 无需细胞裂解
  • 无毒性

只要一步孵育即可直接检测活细胞内的RNA!
检测完成后,探针可以从细胞中排出,细胞仍可用于下游实验分析!
索取SmartFlare 中文手册>>

SmartFlare™ RNA“灵光”技术原理:
每个SmartFlare™探针都是一个纳米金颗粒上面连接着多拷贝的双链寡核苷酸序列,其中一条链(“报告链”)带有荧光集团,靠近纳米金颗粒时,荧光淬灭。当目标RNA与纳米金颗粒上的“捕获链“结合时,“报告链”被释放,上面的荧光基团会发出荧光,通过荧光检测平台检测到。

SmartFlareTM RNA“灵光”应用举例:
1) 利用胞内的RNA标志物进行细胞分选,分选后的细胞仍可用于下游研究。
以miR-155为标志物进行细胞筛选:用10 ng/mL of TNF alpha 刺激miR-155高表达和低表达的细胞6小时,然后用VCAM 抗体进行标记,并用流式细胞仪进行分析。
    A. miR-155低表达的细胞经过TNF alpha刺激后,VCAM标记没有明显的增加。 
    B. miR-155高表达的细胞经过TNF alpha刺激后,VCAM标记有明显的上调。
    C. 将TNF alpha 刺激的miR-155低表达和高表达细胞结果重叠,显示MFI值有8.7倍的升高。

2) 用流式细胞仪进行RNA定量
利用SmartFlare™技术检测HeLa和MCF-7细胞中EGFR的mRNA水平及HUVEC和HT1376细胞中FGF2的mRNA水平,结果显示出与定量RT-PCR很好的相关性。

3) 及时观察活细胞中目标RNA的表达:
利用EGFR特异的SmartFlare RNA“灵光”显示MCF7和HeLa细胞中EGFR的表达量不同(红色) 
利用无规则序列的对照探针进行实验,在细胞中看不到任何信号(左边两幅图)。

显微镜显示EGFR SmartFlare RNA“灵光”的特异性和动力学范围


SmartFlareTM RNA“灵光”还可以对miRNAs进行定量检测,同时检测多个目标RNA,在同一细胞样本中对 RNA 和蛋白进行同时检测。
更多的应用期待您的探索!

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