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细胞分析完整解决方案之——细胞毒性检测

                            来源:Application Specialist    2012-7-30

CytoTox-Glo细胞毒性检测试剂(点击进入产品链接)

CytoTox-Glo™ Cytotoxicity Assay (CytoTox-Glo™ 细胞毒性检测系统) 是一种检测死细胞在细胞群中相对数量的发光检测试剂盒。当细胞膜受损后,细胞内的某一类蛋白酶( 死细胞蛋白酶) 被释放出来,CytoTox-Glo™检测的正是这种酶在细胞外的活性。一种可发光的细胞非渗透性肽底物(AAF- 氨基萤光素) 可用于检测这种蛋白酶。释放出的氨基萤光素产物被试剂盒附带的Ultra-Glo™ 重组萤光素酶催化,产生" 辉光型" 发光,从而被检测到。该AAF- 氨基萤光素底物无法穿过细胞膜完好的活细胞,在活细胞群无法产生可检测的信号。因此,发光的强度与正在经历细胞毒效应的细胞数量成正比。通过加入裂解试剂( 试剂盒提供),该试剂盒还能够产生出发光信号,该信号与每个培养孔内的细胞总数相关。用总细胞的发光强度减去死细胞的发光强度即可计算出细胞活力,这样做可以将检测数据对细胞数进行归一化处理,并减少了因检测方法本身对实验体系带来的影响而导致的错误结论。该细胞毒性相关的蛋白酶标志物是组成型表达的,在各细胞系之间高度保守,CytoTox-Glo™ Assay 检测系统与其他细胞活力检测方法具有极好的相关性。

l   检测培养物中死细胞的相对数量:均质的" 加样- 混合- 检测"的操作步骤,加入一种检测试剂就能检测细胞毒性。

l   可区分细胞活性的微小差别:该试剂盒可以产生线性反应曲线,用以区分细胞活力的微小差别,从中等细胞毒性(100% 95%的细胞活力) 到强细胞毒性(5% 0% 细胞活力)

l   归一化细胞毒性数据:归一化死细胞数数据,使得孔与孔、板与板、以及不同时间的数据更有可比性。

l   裂解全部细胞,检测剩余活细胞的相对数目:细胞毒性的增加与活细胞的减少呈相关性。

l   使数据质量更好:降低假阳性( 或假阴性) 的统计学概率,生物发光读数稳定,无荧光干扰。

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