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细胞分析完整解决方案之——活力与增殖

                            来源:Application Specialist    2012-7-30

细胞活力检测

CellTiter 96 AQueous单溶液细胞增殖检测试剂(点击进入产品链接)

区别于传统的MTT检测,使用新型的MTS四唑盐进行细胞增殖检测,极大简化了传统MTT法的操作步骤。由于无需进行洗涤或富集细胞,所以避免了潜在的操作误差对实验结果的影响。

 

l   简化了比色法细胞活力检测 " 加样- 孵育- 检测" 的方案减少了操作步骤( 仅需一步加样),使均质的高通量筛选成为可能。

l   仅需使用单溶液:仅需加入一种溶液,该溶液已经过过滤灭菌,可直接加入检测板中( 不同于MTT)

l   简化分析步骤:不需要事先洗涤或富集细胞,直接在96 孔板读板仪上进行测定。也省掉了MTT 法必须的溶解步骤。

l   增加了灵活性:检测板可以在读数后继续放回到培养箱中进一步显色( 不同于MTT)

l   避免使用有机溶剂:不需要使用有机挥发性溶剂去溶解甲产物( 不同于MTT)

l   非放射性:不需液闪混合液,也不需处理放射性废物( 不像[3H]-胸腺嘧啶掺入检测)

 

CellTiter-Glo发光法细胞活力检测试剂(点击进入产品链接)

    CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability AssayCellTiter-Glo®发光法细胞活力检测试剂盒)是通过对ATP 进行定量测定来检测培养物中活细胞数目的一种均质检测方法。ATP 是活细胞新陈代谢的一个指标。CellTiter-Glo® 检测试剂盒为多孔板而设计,是进行自动化高通量筛选(HTS)、细胞增殖和毒性分析的理想选择。均质检测步骤就是将单一试剂(CellTiter-Glo® 试剂) 直接加入含有血清的培养细胞中,无需洗涤细胞、去除培养基或进行多步加样操作。在384 孔板上,加入试剂并混合后,10 分钟内,该系统可检测到的每个孔内的细胞数最低为15 个。

均质检测的" 加样- 混合- 检测" 的操作方案使得细胞裂解和产生的发光信号与存在的ATP 量成正比,而ATP 量直接与培养物中的细胞数量成正比。CellTiter-Glo® 检测试剂盒产生一种" 辉光型" 的发光信号,半衰期一般大于5 小时,因细胞类型和培养基而异。由于信号半衰期长,不需要使用试剂自动进样器,就可灵活地进行连续的或批量的多孔板处理。独特的均质检测方案避免了那些需要多个步骤的ATP 检测方法可能会引入的误差。

l   简化了细胞活性检测:均质的" 加样- 混合- 检测" 方案极大地减少了其它同类检测所需的操作步骤。

l   细胞用量更少:384 孔板中可检测少至15 个细胞/ 孔,在96孔板上检测50 个细胞/ 孔。可准确地检测到低于常用的比色法和荧光法的检测低限的细胞数。减少了每个检测反应所需的细胞数。

l   迅速获得结果:加入试剂后10 分钟就能获得数据。

l   可自行选择检测方案:可用于多种类型的多孔板操作。可用发光检测仪或CCD 成像设备记录数据。

l   可连续处理培养板:发光信号很稳定,半衰期一般大于5 小时,因细胞类型和培养基种类而异,样品可进行批量处理。产生极好的Z` 因子值,适用于筛选。

l   获得更多信息:Promega 的其它细胞检测试剂盒叠加使用。

 

CellTiter-Fluor细胞活力检测试剂(点击进入产品链接)

CellTiter-Fluor™ Cell Viability Assay (CellTiter-Fluor™ 细胞活力检测试剂盒) 是非裂解性的、单试剂荧光检测试剂盒,用于检测细胞群落中活细胞的相对数量。该系统检测的是活细胞内的蛋白酶活性,该蛋白酶为保守的组成型蛋白,因而可作为细胞活力的生物标志物。该活细胞蛋白酶活性仅与完好的活细胞有关,是通过一种可穿透细胞膜的、可产生荧光的肽底物(Gly-Phe-AFC) 来检测的。该底物进入活细胞后,被活细胞蛋白酶切割,产生荧光信号,该信号的强度与活细胞数量相关。当细胞膜的完整性丧失,以及漏出到周围培养基后,该活细胞蛋白酶的活性即消失。

CellTiter-Fluor™ 细胞活力检测试剂盒可与其它下游检测试剂盒在同一孔中依次叠加使用,用于将检测数据对细胞数量进行归一化处理。使用该试剂盒得到的数据可作为内对照,并可辨别因细胞结团或化合物毒性所导致的错误结论。该试剂盒可与Promega 的多种发光试剂盒、或与其处于不同波长范围的荧光试剂盒相兼容,如检测caspase 激活、报告基因表达或对结合细胞活力进行正交检测。

l   从每个孔中得到更好的数据:该试剂盒可与Promega 的多种发光试剂盒、或与其处于不同波长范围的荧光试剂盒相兼容。

l   对细胞数进行数据归一化:对细胞数进行数据归一化处理使得实验结果在孔与孔之间、板与板之间以及不同实验时间之间更具有可比性。

l   节省细胞培养的费用:在同一孔内进行叠加检测,可免去处理平行板的操作过程,因而可以节约细胞培养的费用。

 

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